У самцов веслоноса также оценивалась степень проявления «брачного наряда»: "+” - брачный наряд только на голове, "+ +” - брачный наряд на голове и спине, "+ + +” - брачный наряд покрывает все тело рыбы, "+ + + +” - брачный наряд покрывает все тело рыбы, генитальное отверстие слегка воспалено /

Все производители рыб были первонерестующие. Как показали приведенные в таблицах 1 и 2 результаты бонитировки и измерений, самцы и самки веслоноса находились в хорошем физиологическом состоянии с 4 стадией зрелости половых продуктов, что позволяло проводить эксперименты с использованием препарата Нерестин.

У самцов с оценкой степени проявления брачного наряда "+” и "+ +” качество спермы оценивается в 2-3 балла по 5-бальной шкале и созревание происходит позже; поэтому такие самцы брались в опыт только как страховой резерв. При наступлении нерестовых температур (120 – 140 С) производителей веслоноса пересаживали в преднерестовые бассейны раздельно по полам.

Инъецирование самок проводили препаратами Нерестин-5 и Нерестин-5А в 2 этапа: предварительная инъекция в 20.00 – 22.00 час. вечера в количестве 20% от общей дозы, разрешающая инъекция через 12 час. в 8.00 – 10.00 час. утра в объеме 80% от общей дозы.

Самцов инъецировали однократно непосредственно после предварительного введения препарата самкам в объеме 50% от общей дозы препарата для самок. Общая доза Нерестина-5 для самок веслоноса точно соответствовала маркировке на флаконах емкостью 20 мл и составила 0,4 мл/кг веса рыбы, а Нерестина-5А – 0,2 мл/кг; или для самок весом, например, 8 кг – 3,2 мл (0,64 + 2,56 мл) и 1,6 мл (0,32 + 1,28 мл) на рыбу, соответственно.

Некоторые из флаконов препарата на дату применения уже имели истекший 2-х летний срок годности, но заметного снижения активности препаратов выявлено не было. Самцам и самкам с более выраженными признаками готовности к воспроизводству (по совокупности показателей таблиц 1 и 2) вводимые дозы препаратов снижали на 4 - 8% от рекомендуемых.

Небольшие объемы препарата вводили инсулиновым шприцем или точно градуированным шприцем объемом 2,0 мл внутримышечно на глубину 1,5 см в спинную область рыб на удалении 10 - 15 см от головы и с наклоном иглы в ее сторону. Место укола придавливали пальцем и массировали для предотвращения вытекания препарата наружу и ускорения его поступления в кровоток. Воспалений у рыб в месте укола и каких-либо побочных реакций не наблюдалось, поведение рыб было спокойным. Действие препаратов Нерестин-5 и Нерестин-5А было мягким и отличия между ними заключались только в объеме введения. Все, указанные в табл. 1 самки веслоноса ответили положительно на Нерестин-5(5А) овуляцией и спермиацией.

У самок икра овулировала через 24 - 28 час. после второй инъекции. Оплодотворение икры от каждой самки производили спермой от 2-3-х самцов. Так как сперму получали методом шприцевого отсасывания, конечный объем эякулята не измерялся, но визуально его качество и количество были в норме. Овулированные ооциты получали прижизненно отцеживанием после надрезания яйцеводов по методу С.Б. Подушки.

Выживаемость самцов и самок веслоноса после произведенных инъекций и операций составила 100%. Средняя рабочая плодовитость 9-ти годовалых самок равнялась 120000 икринок, 10-ти годовалых – 148000 икринок.

Средний процент оплодотворения икры составил 84%, процент выклева личинок – 76%, выживаемость деловых личинок при их средней навеске 8-10 мг – 93%. Инкубация икры осуществлялась в аппарате типа «Стерлядь», разработанном НИРХСом в 1992 году. Выклев личинок при температуре 13-140 С происходил на 5 - 7 сутки. Уродств и аномалий развития личинок не отмечено. Перевод личинок веслоноса на смешанное активное питание и подращивание молоди до средней навески 340 мг в течение 21 - 22 суток производили на естественных кормах (зоопланктон) в бетонных бассейнах при начальной плотности посадки 80000 шт/м3.

Выживаемость подрощенной молоди от общего количества деловых личинок составила 86,5%. Всего за период 2001 - 2004 гг в Румынии и Молдове для искусственного воспроизводства были инъецированы Нерестином-5(5А) 86 самок веслоноса, из которых положительно ответили на препарат 81 шт., т.е. 94,1%.

Кроме того, сотрудник НИРХСа П.Д. Ариков (персональное сообщение) в 2002 г. в Молдове инъецировал Нерестином-5А 12-ти годовиков веслоноса, 4-х самок средним весом 12 кг и 3-х самцов по 8,5 кг. При температуре воды 11,5 - 14,0 0С и схеме инъецирования, описанной выше, им получено полное созревание всех производителей (самок – в среднем через 47 час. после первой инъекции) с отцеживанием в среднем по 1,2 кг икры от самок, при проценте оплодотворения икры – 85%, количестве вылупившихся личинок по отношению ко всей икре – 57%, выживаемости личинок через 5 суток – 75%.

Для искусственного воспроизводства севрюги (Acipenser stellatus) из р.Дунай за период 1995-2004 гг. были использованы 38 самок средней массой 6,4 кг (4,5 – 9,8 кг) и 51 самец средней массой 5,5 кг.

Отлов диких производителей осетровых рыб осуществлялся предприятиями Румынии «Братеш Мик» (экспериментальная база Центра по рыбоводству, рыболовству и переработке рыбы, г.Галац) и «Кавиар Хаус» (частное хозяйство) в пределах выделенных государством квот.

Рыбы перенесли стресс отлова и транспортировки, часть из них имела внешние травмы. Овулированные ооциты от самок и сперму от самцов севрюги получали с использованием препаратов Нерестин-5 в общей дозе 0,4 мл/кг и Нерестина-5А (0,2 мл/кг) при температуре воды 22-24 0С.

Рыб инъецировали внутримышечно на уровне третьей спинной жучки шприцем емкостью 2,0 мл на глубину 1,5 см. Препараты самкам давали дробно (20% + 80%) с интервалом 12 час, самцам давали 50% от общей дозы для самок одновременно с предварительной инъекцией.

Самцы созревали раньше самок, сперму получали методом шприцевого отсасывания через 12-18 час. после инъекций и хранили в холодильнике. Возможное снижение дозы для самцов до 1/3 от дозы для самок пока не применяли.

Самки созревали через 24-28 час. после второй инъекции и икру от них брали прижизненно отцеживанием после надреза яйцеводов. В среднем 72% диких выловленных из Дуная стрессированных производителей севрюги положительно ответили на препараты овуляцией и спермиацией (в основном "не ответили” рыбы, имевшие травмы), из них 85% самок и 62% самцов.

В улов попадали самцы, уже участвовавшие в естественном нересте в Дунае, они, по-видимому, также не среагировали на препарат. Выживаемость рыб после проведенных операций составила 83% (гибли раненные и сильно стрессированные), процент оплодотворения икры – 81%, количество выклюнувшихся личинок – 76%. Рабочая плодовитость самок севрюги была на уровне 100 - 150 тыс. икринок, объем взятого шприцем эякулята у самцов – по 10 мл

. Икру каждой самки оплодотворяли спермой 2-3-х самцов. Инкубацию икры проводили при t = 23 - 24 0С в аппаратах «Стерлядь», выклев личинок происходил через 4,5 – 5 суток. Уродств и аномалий развития икры сверх нормативных не отмечено. Средняя навеска полученных деловых личинок севрюги – 8 - 12 мг.

Подращивание производили в пластиковых бассейнах при начальной плотности посадки 50 – 60 тыс. шт/м3 в течение двух недель на зоопланктоне до средней навески 100 – 150 мг. Выживаемость полученной молоди была на уровне 63% от посаженных на подращивание личинок. Русского осетра р.Дунай (Acipenser gueldenstaedti colchicus) воспроизводили в конце мая на базе «Кавиар Хаус».

Брали из улова 4-х самок весом 25 – 30 кг и самцов 15 – 18 кг. Рыб инъецировали Нерестином-5А (0,2 мл/кг для самок двукратно с интервалом 12 час. по схеме 20+80% и 0,1 мл/кг для самцов однократно сразу после предварительной инъекции самкам) при t = 18 – 20 0С.

Рабочая плодовитость самок составила 180 тыс. икринок, процент оплодотворения – 84%, выклева – 75%. Молодь переводили на активное смешанное питание зоопланктоном и трубочником до навески 300 мг, но выход составил 48% ввиду отсутствия в нужное время корма и проявлений каннибализма.

Этот показатель по той же причине каннибализма был снижен у севрюжат и, особенно, у молоди веслоноса. 20 тыс. шт. молоди осетра навеской 5 г выпущено на зарыбление р. Дунай, остальная молодь сейчас выращивается в пластиковых бассейнах на искусственных кормах. 100% производителей выжили; самок выпустили в Дунай, самцов утилизировали. Воспроизводство белуги осуществлено от единичных экземпляров диких производителей из р. Дунай в период с 01.03. по 27.04.2004 г.

Место работы – хозяйство «Кавиар Хаус», п.Исакча, Румыния. Использован препарат Нерестин-5А, дата выпуска 04.03.2002 г, серия 14 и, добавочно, серия 10 от 16.01.2003 г. Самку белуги весом около 150-160 кг, длиной 265 см, предварительно, до инъекций, выдерживали в пластиковом бассейне.

Общий объем введенного препарата этой самке при t0 = 10,5 0С составил 34 мл в три инъекции (задержка овуляции и необходимость третьей инъекции были связаны с ошибкой в определении веса рыбы). Через 12 час. после последнего укола (еще 20% сверх расчетной дозы 0,2 мл/кг) была получена овулированная икра в количестве 12 кг.

Сперму от трех диких самцов белуги средней массой 97 кг отбирали через 8 –10 час. после однократного инъецирования препарата в дозе 0,1 мл/кг, или 9,7 – 10,0 мл на рыбу. В одном грамме икры содержалось 39 икринок. Продолжительность инкубации составила 7 суток при выклеве 88%.

Молодь на активное питание зоопланктоном и трубочником переводили в стеклопластиковых бассейнах при плотности посадки 60 тыс. шт./м3. Через 20 дней подращивания до 500 мг навески выход молоди составил 52,5%.

Другую самку белуги весом 180-200 кг, длиной 286 см инъецировали двукратно (20% + 80%) в общей дозе 0,1 мл/кг Нерестином-5Б с датой выпуска 02.03.2004 г. Эта самка имела проникающую рану на глубину 5 – 6 см в затылочной части на уровне третьей спинной жучки.

Однако и эта рыба своевременно дала овулированную икру в количестве 18 кг. От трех самцов белуги при дозе 0,05 мл/кг полученных половых продуктов при овуляции у самок и спермиации у самцов, проценты оплодотворения икры, выхода деловых личинок и молоди рыб после подращивания, выживаемости рыб и другие показатели.

Результаты указывают на высокую эффективность применения Нерестина-5 и его аналогов в искусственном воспроизводстве осетровых рыб и веслоноса.